Une méthode immunofluorescente en flux quantitatif a été établie pour détecter la teneur en acide pénicillique (BA). Tout d'abord, un anticorps monoclonal anti-BA à haute affinité a été obtenu en immunisant avec un antigène complet BA-BSA synthétisé. Ensuite, l'antigène synthétisé BA-BSA a été marqué avec de la phycocyanine et a concurrencé le BA dans l'échantillon pour se lier aux anticorps monoclonaux anti-BA couplés à des microbilles fluorescentes. La détection quantitative du BA dans les échantillons a été réalisée par mesure de l'intensité moyenne de fluorescence à la surface des microbilles via un immunofluorimètre en flux. La plage linéaire pour le BA était de 1,01 à 97,96 μg/L, la concentration inhibitrice médiane (IC50) était 9,92 μg/L, le coefficient de corrélation (r2) était 0,9998, et la limite de détection était de 0,56 μg/kg. Le taux de récupération de l'ajout variait de 90,4 % à 104 %, avec un écart type relatif de 5,0 % à 9,8 %. La méthode était très spécifique, avec une réaction croisée inférieure à 0,1 % avec l’ochratoxine A, l’aflatoxine B1, l’aflatoxine M1, la fumonisine B1 et la fumonisine B2. Les résultats des échantillons réels concordaient avec ceux obtenus par chromatographie liquide haute performance couplée à la spectrométrie de masse en tandem. La méthode immunofluorescente en flux établie est simple, rapide, sensible, précise et peut être appliquée à l’analyse et à la détection d’autres mycotoxines dans divers matrices alimentaires complexes.
关键词
Méthode immunofluorescente en flux; Acide pénicillique; Antigène; Anticorps; Sécurité alimentaire