Méthode de dérivation en phase pré-colonne - chromatographie liquide haute performance - spectrométrie de masse triple quadrupôle pour la détermination de 9 acides biliaires dans les taches de sang sec

WANG Zi-qing ,  

MENG Zi-xuan ,  

HAO Li-ping ,  

ZHANG Ruo-yu ,  

ZHANG Hao-ran ,  

LIU Kai-xuan ,  

KANG Wei-jun ,  

AI Lian-feng ,  

摘要

Cet article établit une méthode efficace et fiable pour la détermination de 9 acides biliaires dans les taches de sang sec par dérivation en phase pré-colonne - chromatographie liquide haute performance - spectrométrie de masse triple quadrupôle. Les échantillons ont été extraits avec du méthanol par agitation vortex, dérivés avec une solution de 2-hydrazinopyridine en acétonitrile, puis séchés à l'air, ré-dissous dans une solution aqueuse à 50% de méthanol, filtrés à travers une membrane organique de 0,22 µm, et analysés quantitativement par méthode d’étalonnage interne. La colonne chromatographique T3 a été sélectionnée, avec une phase mobile eau (0,1% d’acide formique) - méthanol-acétonitrile (9:1, ratio volumique) pour une élution en gradient, en mode ion positif en spectrométrie et détection en mode surveillance multiple de réactions. Les résultats montrent une bonne linéarité des courbes étalons pour les 9 composés cibles (r² de 0,9982 à 0,9998), des limites de détection (LOD) de 0,2~2,0 nmol/L, des limites de quantification (LOQ) de 1,0~10 nmol/L, des recouvrements de 92,4% à 109%, des écarts-type relatifs (RSD) inférieurs à 15%, des RSD intra- et inter-lots inférieurs à 12%, un effet matrice relatif de 89,6% ~ 109% (RSD ≤ 11%), et une stabilité des dérivés conservés à 4 ℃ pendant 48 h. Par comparaison avec les résultats des échantillons sériques, une corrélation et une cohérence élevées ont été observées. La méthode présente une bonne sélectivité et une bonne linéarité, sans effet matrice ou effet de transport apparent, une bonne stabilité des analytes cibles, et peut être utilisée pour la détection rapide des acides biliaires dans les taches de sang sec.

关键词

acides biliaires; taches de sang sec; chromatographie liquide - spectrométrie de masse; dérivation

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