La méthode d'analyse de concentration sans étalon (CFCA) basée sur la technologie de résonance plasmonique de surface (SPR) permet de mesurer la concentration active des protéines sans recourir à aucun étalon, en utilisant uniquement les coefficients de diffusion connus des protéines et la mesure de la concentration active dans des conditions de diffusion limitée. Cette étude propose une méthode CFCA sous forme de capture (CCFCA) pour déterminer la concentration active de la protéine CYFRA21-1. Les résultats montrent que la valeur mesurée par la méthode CCFCA est de 0,67 mg/mL, avec une précision journalière de 4,6 %, tandis que la valeur mesurée par la méthode CFCA est de 0,7 mg/mL avec une précision journalière de 6,5 %. De plus, le niveau de couplage des anticorps a toujours été un facteur limitant clé de l'utilisation de la méthode CFCA ; un stockage ou une activation inappropriée des puces peut entraîner un niveau de couplage des anticorps en surface insuffisant pour surmonter les restrictions de transfert de masse requises par la méthode CFCA (exigences méthodologiques QC_ratio>0,2), rendant les résultats non fiables. Comme la méthode de capture peut orienter spatialement les anticorps de manière plus appropriée avec l’aide de la protéine G , elle permet des résultats précis et stables du CCFCA même à faible niveau de couplage. Par rapport à la méthode CFCA classique, le CCFCA fournit des résultats fiables, et une puce unique régénérée peut être utilisée pour tester plusieurs couples anticorps-analytes, ce qui en fait un meilleur choix pour la mesure future de la concentration active des protéines.

Quantification sans étalon;CYFRA21-1;Concentration de protéine active;Méthode de capture