Recherche sur la méthode d’analyse quantitative de l’ADN basée sur une puce d’électrophorèse sur gel

LI Zhen-qing ,  

CHEN Qin ,  

ZHU Jian-dong ,  

ZENG Yuan ,  

ZHANG Da-wei ,  

Yamaguchi Yoshinori ,  

摘要

Pour déterminer la longueur et la concentration de l’ADN dans les bandes après électrophorèse sur gel, cet article propose une méthode efficace d’analyse précise de la longueur et de la concentration de l’ADN basée sur l’intensité de fluorescence de l’ADN. Une électrophorèse sur gel a été réalisée avec une échelle D2000 DNA ladder, les images ont été capturées et traitées. L’analyse des données a utilisé la relation linéaire entre l’intensité de fluorescence et la concentration d’ADN, ainsi que la relation linéaire entre la distance de migration et la longueur de l’ADN. Les résultats montrent que lors de l’utilisation du SYBR Green I comme colorant fluorescent pour l’électrophorèse de l’ADN, les valeurs de niveaux de gris vert et rouge dans chaque pixel de l’image reflètent les caractéristiques de l’ADN, avec une valeur de gris vert nettement plus élevée que celle du rouge ; pour les fragments d’ADN de moins de 2000 pb, la masse moléculaire est inversement proportionnelle à la distance de migration, et le coefficient de corrélation atteint 0,971 lorsque les deux prennent leurs logarithmes, ce qui permet d’établir un modèle mathématique de la masse moléculaire en fonction de la distance de migration pour calculer la masse moléculaire ; en calculant la valeur du pic de l’électrophorèse et la surface d’intégration du pic, il a été constaté que pour deux bandes d’ADN avec un rapport de concentration de 2∶1, les rapports étaient de 2,16 et 1,96, 2,11 et 1,94, 2,16 et 1,93, indiquant que la surface d’intégration du pic d’électrophorèse reflète plus efficacement la concentration réelle d’ADN. Cette étude a une importante valeur appliquée pour le développement d’instruments d’électrophorèse sur gel d’acides nucléiques.

关键词

acides nucléiques; électrophorèse sur gel; analyse quantitative; puce biologique

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