Une méthode d'analyse de la distribution des sels de sodium des oligonucléotides par spectrométrie de masse à désorption/ionisation laser assistée par matrice avec temps de vol (MALDI-TOF MS) a été établie. Des échantillons d'amorces oligonucléotidiques simple brin (longueur de 20 pb, poids moléculaire théorique de 6 071,02 Da) dissous dans de l'eau pure ont été examinés par chromatographie liquide à haute performance couplée à la spectrométrie de masse (HPLC-MS) et MALDI-TOF MS ; après ajout d'acétate de sodium, précipitation par alcool et reconstitution, les échantillons ont de nouveau été analysés par HPLC-MS et MALDI-TOF MS en mode ions positifs. Avant et après ajout de sodium, HPLC-MS couplé à la déconvolution n'a montré qu'un seul composant non salé (poids moléculaire 6 069,9 Da et 6 069,8 Da respectivement) ; tandis que MALDI-TOF MS a révélé un seul composant pour l'échantillon non salé (poids moléculaire 6 071,09 Da) et une distribution de composants pour l'échantillon salé avec des molécules comportant différents nombres d'ions sodium : les composants partent de la molécule non sodée (environ 6 071 Da), avec un contenu d'abord croissant puis décroissant, le nombre d'ions sodium variant de 0~4 à 0~19 selon les conditions d'ajout de sel. Ces résultats démontrent la capacité de MALDI-TOF MS à détecter la distribution des sels de sodium des oligonucléotides, avec une adaptabilité et une sensibilité élevées envers une gamme de molécules oligonucléotidiques à différents degrés de salage. En utilisant comme exemple le médicament antisens oligonucléotidique fomivirsène sodique, MALDI-TOF MS a analysé le produit pur de fomivirsène sodique et un modèle de solution injectable animale contenant du polyéthylène glycol et du Tween. Les résultats montrent que la forme de sodium principale est de 0 à 3 ions sodium, avec une tendance générale à la diminution du contenu, sans changement avant et après addition de la matrice ; la déviation des composants de fomivirsène est dans une plage de ±0,5 Da, indiquant que la précision n'est pas affectée par la matrice. De plus, plusieurs autres composants dans la matrice (y compris le polyéthylène glycol 300 et Tween-80) apparaissent indépendamment sur le spectre de masse sans interférer avec les composants de fomivirsène. Cette méthode est simple, rapide, sensible, adaptée à l'identification qualitative de la distribution des sels de sodium des oligonucléotides, et n'est pas influencée par la matrice lors de l'analyse des médicaments réels, ce qui est significatif pour le développement et le contrôle des médicaments oligonucléotidiques antisens (ASO).

MALDI-TOF MS;Oligonucléotides;Distribution des sels de sodium des oligonucléotides;Analyse qualitative