Par extraction ultrasonique avec une solution méthanolique alcaline, combinée à l'hydrolyse par β-glucosidase dérivée de l'amande et une extraction dispersive en phase solide à base de polyamide, une méthode a été établie pour déterminer la quantité totale d'activité des isoflavones du soja par chromatographie liquide ultra-performante. Les isoflavones malonylées et acétylées dans l'échantillon sont hydrolysées en glycosides basiques sous conditions alcalines, puis davantage déglucosylées en aglycones correspondants sous l'action de la β-glucosidase. Les 12 formes différentes d'isoflavones dans l'échantillon se transforment en seulement 3 aglycones majeurs (daidzéine, génistéine, glycitrine), suivis d'une extraction dispersive en phase solide avec de la poudre de polyamide et séparation sur une colonne chromatographique réverse C18 (2,1 mm i.d. × 50 mm, 1,8 µm). Les résultats montrent que le daidzéine, la génistéine et la glycitrine sont séparées baseline en 3 minutes, les coefficients de corrélation des courbes standard (r2) pour les 3 aglycones dépassent 0,999, le taux de récupération totale des isoflavones est de 94,3 % à 102 %, la déviation standard relative (RSD, n=6) est inférieure à 5,0 %, démontrant une bonne précision et exactitude. Cette méthode calcule la quantité totale d’isoflavones en détectant tous les aglycones présents dans l’échantillon, aidant à réduire les défis liés à la séparation, la précision et le coût de détection. En considérant les mécanismes de transformation et d’absorption physiologique des isoflavones dans le corps, la quantification basée sur la somme totale des aglycones reflète plus scientifiquement le niveau réel d’activité des isoflavones et évite une surestimation due à l’addition simple des glycosides et aglycones.

Isoflavones du soja;Polyamide (PA);Extraction dispersive en phase solide (d-SPE);β-glucosidase;Chromatographie liquide ultra-performante (UPLC)