La génération d'harmonique de second ordre (SHG) est utilisée dans de nombreuses disciplines grâce à ses avantages tels que l'absence de marquage, une faible phototoxicité et une sensibilité à la structure des matériaux. Cette étude utilise la peau de souris in vivo comme modèle pour explorer les conditions d'imagerie SHG au microscope à deux photons. La glycérine a été utilisée comme agent d'éclaircissement, et l'intensité du signal SHG ainsi que la profondeur d'imagerie de la peau traitée à la glycérine et à l'eau ont été statistiquement comparées. Des différences significatives (*p ≤ 0,05) ont été observées entre les groupes traités à la glycérine et à l'eau, prouvant que la glycérine est un agent d'éclaircissement efficace pour les expériences in vivo sur la peau. En examinant la puissance du laser, les propriétés de fluorescence spontanée des tissus biologiques, et la profondeur d'imagerie, la longueur d'onde d'excitation optimale pour l'imagerie SHG au microscope à deux photons a été déterminée à 900 nm. L'utilisation de la glycérine pour l'éclaircissement et de la longueur d'onde d'excitation optimale a permis de collecter le signal SHG de la peau tumorale, réalisant une observation in vivo de l'effet de la tumeur sur la structure des fibres de collagène de la peau. Les résultats montrent que le microscope à deux photons peut efficacement effectuer l'imagerie SHG, permettant l'observation in vivo et la visualisation structurelle des fibres de collagène dans les organismes vivants.

Microscope à deux photons;Génération d'harmonique de second ordre;Tumeur;Collagène