Gaschromatographie-Massenspektrometrie zur Bestimmung von 31 freien Fettsäuren im Plasma

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摘要

Es wurde eine Analysemethode mittels Gaschromatographie-Massenspektrometrie (GC-MS) zur Bestimmung der Konzentration von 31 freien Fettsäuren (FFAs) im Plasma entwickelt. Durch den Vergleich und die Optimierung der Extraktions-, Anreicherungs- und Derivatisierungsmethoden für FFAs wurde Chloroform:Methanol (Volumenverhältnis 1:2) als Extraktionsmittel und die Acetylchlorid-Methode als Derivatisierungsmethode festgelegt. Die Ergebnisse zeigten eine gute Linearität der 31 FFAs innerhalb ihrer jeweiligen Konzentrationsbereiche mit Korrelationskoeffizienten (r) von mindestens 0,9990; die Nachweisgrenzen (LOD, S/N≥3) und Quantifizierungsgrenzen (LOQ, S/N≥10) lagen bei 0,010~0,050 μg/mL bzw. 0,034~0,167 μg/mL. Die Methodik wurde mit C13:0 und C23:0 als Zielsubstanzen validiert; die Wiederfindungsraten der Plasmakontrollproben lagen bei 86,3% bis 115%, die relative Standardabweichung (RSD, n=6) überschritt nicht 9,6%, die inner-tägige RSD (n=6) war maximal 6,3% und die tageübergreifende RSD (n=3) lag unter 7,8%. Die Methode wurde zur Bestimmung des FFA-Gehalts in 49 Plasmaproben schwangerer Frauen angewandt, wobei 21 bis 31 FFAs nachgewiesen wurden. Darunter zählen C16:0 (Palmitinsäure), C18:2n6c (Linolsäure), C18:1n9c (Ölsäure) und C18:0 (Stearinsäure) zu den Haupt-FFAs im Plasma schwangerer Frauen. Die Methode ermöglicht den Nachweis von mehr FFA-Typen, benötigt geringere Probenmengen und besitzt niedrigere LOD- und LOQ-Werte, wodurch eine genaue qualitative und quantitative Analyse möglich ist und sie somit für die Analyse von FFAs im Plasma verwendet werden kann.

关键词

freie Fettsäuren; Gaschromatographie-Massenspektrometrie; Derivatisierung; Plasma

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