Es wurde eine Methode zur Nierenmetabolom-Analyse basierend auf Hochleistungsflüssigchromatographie gekoppelt mit Ultrahochauflösender Massenspektrometrie entwickelt. Nierengewebe wurde in flüssigem Stickstoff zu Pulver gemahlen und anschließend mit einem Lösungsmittelsystem aus Methyl-tert-butylether/Methanol/Wasser extrahiert, wobei jeweils eine stark polare Fraktion (Unterschicht) und eine schwach polare Fraktion (Oberschicht) erhalten wurde. Anschließend wurden die Extrakte mittels gradueller Elution auf einer HILIC-Hydrophilen-Interaktionsflüssigchromatographiesäule und einer umgekehrten C₁₈-Säule getrennt und mittels hochauflösender Massenspektrometrie analysiert. Es wurde eine Elektrospray-Ionisationsquelle (ESI) im positiven und negativen Ionenmodus verwendet, im Vollscanmodus mit einem Scanbereich von 100 bis 1000 Da und einer Massengenauigkeit von 120.000. Die Ergebnisse zeigen, dass die Methode eine hohe Empfindlichkeit, Spezifität und gute Stabilität aufweist und gleichzeitig Informationen zu stark polaren und schwach polaren Metaboliten im Nierengewebe liefert, wodurch eine neue Methode zur Entdeckung von Biomarkern für Nierenerkrankungen und nephrotoxische Arzneimittel bereitgestellt wird.

Hochleistungsflüssigchromatographie - Ultrahochauflösende Massenspektrometrie; Metabolomik; Niere; Probenvorbereitung