Am Beispiel der Bestimmung von drei fettlöslichen Vitaminen im menschlichen Serum wurde eine Analysemethode für endogene Metaboliten im Körper untersucht. Die Detektion von Vitamin A, Vitamin D3 und Vitamin E im menschlichen Serum erfolgte mittels Flüssigchromatographie gekoppelt mit Tandem-Massenspektrometrie (LC-MS/MS). Kalibrierkurven wurden jeweils durch Zugabe von Standards und internen Standards zur Mischung menschlichen Serummenüs und anschließender Subtraktion des endogenen Hintergrunds sowie durch Zugabe von Standards zu einer simulierten Matrix auf Basis von Rinderserumalbumin (BSA) erstellt. Die Ergebnisse zeigten, dass die Nachweisgrenzen für Vitamin A, D3 und E mit der Methode basierend auf der menschlichen Serummischmatrix bei 4,2, 0,8 bzw. 67,2 ng/mL lagen, die Quantifizierungsgrenzen bei 13,7, 2,6 bzw. 221,9 ng/mL. Die linearen Korrelationskoeffizienten beider Methoden waren größer als 0,996; die Wiederfindungsraten bei niedrigen und hohen Zusatzkonzentrationen von realen Proben lagen zwischen 90,7 % und 112 %, die relative Standardabweichung (RSD) zwischen 1,0 % und 4,5 %, was auf eine gute Genauigkeit und Reproduzierbarkeit hinweist. Die Analyseergebnisse von 40 unbekannten Proben zeigten keine statistisch signifikanten Unterschiede zwischen den beiden Methoden. Daher ermöglicht die Methode der Subtraktion des Hintergrunds unter Verwendung der menschlichen Serummischmatrix für endogene Metaboliten eine genaue Analyse der Übereinstimmung der Matrizen von Standards und zu testenden Proben, was die klinische Diagnose verwandter Erkrankungen erleichtert.

fettlösliche Vitamine; Flüssigchromatographie-Tandem-Massenspektrometrie (LC-MS/MS); endogene Metaboliten; menschliche Serummatrix