Eine analytische Methode wurde etabliert, um α-Laktalbumin (α-La) und β-Laktoglobulin (β-Lg) in Molkenproteinpulver mittels ultraschneller Flüssigchromatographie gekoppelt mit tandemmassenspektrometrischer Analyse mit Triple-Quadrupol (UPLC-MS/MS) zu bestimmen. Die Proben wurden mit Iodacetamid alkylieret und anschließend mit alkalischer Trypsinverdauung behandelt. Die Trennung erfolgte auf einer Waters ACQUITY UPLC-BEH C18 Säule, 300 , mit einer mobilen Phase aus 0,1 % Ameisensäure in Wasser und 0,1 % Ameisensäure in Acetonitril, gradienteneluiert, Detektion im positiven Ion-Multiple Reaction Monitoring (MRM)-Modus, Quantifizierung durch interne Standardmethode. Die Ergebnisse zeigten eine gute lineare Beziehung für α-Laktalbumin und β-Laktoglobulin im Bereich von 40 bis 1.000 nmol/L bzw. 80 bis 2.000 nmol/L, der quantitative Nachweisgrenze (S/N=10) lag bei 0,020 g/100 g; die Aufschlussrückgewinnung lag bei 84,7 % bis 95,6 %, die relative Standardabweichung (RSD, n=6) bei 1,6 % bis 5,8 %. Basierend auf der oben genannten Methode wurden der Gehalt bestimmt und Unterschiede von 4 Arten von Molkenproteinpulvern (entsalztes Molkenpulver D70 und D90, konzentriertes Molkenproteinpulver und α-Laktalbuminpulver) aus 5 Ländern verglichen. Die Methode ist einfach zu bedienen, genau und kann für die Bestimmung von α-Laktalbumin und β-Laktoglobulin in proteinreichen Rohstoffen wie Molkenproteinpulver verwendet werden.

Ultraschnelle Flüssigchromatographie gekoppelt an die Triple-Quadrupol-Tandem-Massenspektrometrie;α-Laktalbumin;β-Laktoglobulin;Molkenproteinpulver