Es wurde eine nicht-zielgerichtete Metabolomik-Methode basierend auf der Kopplung von Ultra-Performance-Flüssigkeitschromatographie, Ionenfalle und Flugzeit-Massenspektrometrie (UPLC-IT-TOF MS) entwickelt, um Unterschiede in den Metaboliten zwischen menschlichen chronischen myeloischen Leukämiezellen und ihren Adriamycin-resistenten Zellen (K562 und K562-ADM) zu untersuchen. Es wurde der Einfluss der Zellaufschlussmethode, des Extraktionslösungsmittelsystems und des Lösungsmittelvolumens auf den Extraktionseffekt der Zellmetaboliten untersucht. Die Experimente zeigten, dass bei Ultraschallaufschluss mit 800 μL 80% Methanol extrahiert wurde und dabei mehr metabolische Merkmalspeaks erhalten wurden, wobei Methode hohe Reproduzierbarkeit und Stabilität aufwies. Die etablierte Methode wurde zur Untersuchung metabolischer Unterschiede zwischen K562- und K562-ADM-Zellen angewandt, und die erhaltenen Daten wurden mittels Hauptkomponentenanalyse (PCA) und orthogonaler partieller Kleinsten-Quadrate-Discriminanzanalyse (OPLS-DA) ausgewertet. Die Ergebnisse zeigten signifikante metabolische Unterschiede zwischen den beiden Zelltypen und identifizierten 40 Metaboliten mit erheblichem Beitrag zur Klassifizierung. Die differenziellen Metaboliten waren hauptsächlich in Aminosäurestoffwechsel, Sphingolipidstoffwechsel, Purin- und Pyrimidinstoffwechselwege involviert. Die Methode kann zur Untersuchung metabolischer Unterschiede zwischen K562- und K562-ADM-Zellen verwendet werden und könnte zur metabolomischen Erforschung der Resistenz von Leukämiezellen beitragen.

Leukämiezellen; nicht-zielgerichtete Metabolomik; Ultra-Performance-Flüssigkeitschromatographie-Massenspektrometrie; Adriamycinresistenz