Nach der Assemblierung von Thiol-DNA auf der Oberfläche von Goldnanopartikeln (AuNPs) zur Herstellung von AuNPs-DNA-Biosonden katalysiert die Terminal-Deoxynukleotidyl-Transferase (TdTase) das Wachstum der DNA am 3′-OH-Ende der Sonde, wodurch lange einzelsträngige DNA (ssDNA) entsteht. Die Sonde und ssDNA wurden mittels Agarose-Gelelektrophorese und Rasterkraftmikroskopie (AFM) charakterisiert. Die Ergebnisse zeigen, dass TdTase ein effizientes Wachstum von DNA an der Nanogrenzfläche ermöglicht, wobei die Kettenlänge unter gewundenen Bedingungen bis zu 850 nm erreichen kann. Diese DNA-Wachstumsstrategie wurde weiter mit der Aptamer-Technik kombiniert. Zuerst wurde Aptamer-Fragment 1 auf der Oberfläche des Goldnanopartikels assembliert, dann Aptamer-Fragment 2 auf aldehyd-funktionalisierten magnetischen Partikeln, um einen Aptasensor gegen Enrofloxacin (ENR) zu konstruieren. Der Sensor zeigte eine gute Reaktionsfähigkeit auf ENR im Bereich von 10 bis 1,0×10^5 ng/mL mit einer Nachweisgrenze von 1,0 ng/mL und konnte deutlich zwischen Ciprofloxacin, Ofloxacin und Norfloxacin als Kontrollgruppen unterscheiden. Die Studie zeigt, dass der auf TdTase basierende Aptasensor einfach zu bedienen ist, eine gute Zielmolekülantwort und Spezifität aufweist und neue Forschungsideen für Bereiche wie die Lebensmittelsicherheit bieten kann.

Nanonachweis; Terminal-Deoxynukleotidyl-Transferase (TdTase); DNA-Wachstum; Aptasensor; Enrofloxacin