DNA-Lipid-Sonde zur in situ-Bildgebung des extrazellulären pH-Werts der Zellmembran

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摘要

Automatische Kopplung von Diacylliposomen an DNA-Stränge mit i-Motiv-Struktur, die an beiden Enden mit Cy3 und Cy5 markiert sind, zur Bildung von Diacylliposom-DNA-Konjugaten (DNA-Lipid) Sonde. Die starke hydrophobe Wechselwirkung zwischen Diacylliposomen und Zellmembran ermöglicht es dieser Sonde, sich direkt in die Zellmembranoberfläche einzufügen, wodurch eine ratiometrische Detektion des extrazellulären pH-Werts unter Hypoxie- und Normoxiebedingungen realisiert wird. Bei hohem pH-Wert sind die fluoreszierenden Gruppen an den Enden der DNA-Stränge mit i-Motiv-Struktur getrennt, es gibt keinen FRET-Effekt; bei niedrigem pH-Wert bilden die DNA-Stränge mit i-Motiv-Struktur auf der Zellmembranoberfläche Tetramere, die fluoreszierenden Gruppen nähern sich an und erzeugen einen starken FRET-Effekt. Die quantitative pH-Bestimmung erfolgt durch Messung des Verhältnisses der Fluoreszenzintensitäten der beiden fluoreszierenden Gruppen. Durch die empfindliche Reaktion dieser Sonde auf den pH-Wert wird eine genaue Messung des extrazellulären pH-Werts in hypoxischen Umgebungen ermöglicht, was in der Physiopathologie von großer Bedeutung ist.

关键词

hypoxische Umgebung; extrazellulärer pH-Wert; i-Motiv-Struktur; Diacyl-Liposomen; Fluoreszenz-Resonanz-Energie-Transfer; Bildanalyse

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