In dieser Studie wurde innovativ ein einfaches, kostengünstiges und hochempfindliches System zur dynamischen Lichtstreuung (DLS) entwickelt, das mit der endonukleasebasierten Kettenverdrängungs-Amplifikation (NESDA) kombiniert wird, um Aflatoxin M1 (AFM1) nachzuweisen. Bei Anwesenheit von AFM1 hybridisiert die Sequenz, die den AFM1-Aptamer enthält, teilweise mit der Primer-DNA, was die NESDA-Reaktion auslöst und eine große Menge an Einzelstrang-DNA (ssDNA) produziert. Die entstehende Einzelstrang-DNA hybridisiert mit Goldnanopartikel-DNA-Sonden, was zur Aggregation der Goldnanopartikel führt und deren durchschnittlichen hydrodynamischen Durchmesser erhöht. Diese Änderung kann mittels DLS detektiert und quantitativ analysiert werden. Zur Verbesserung der Nachweisleistung untersuchte das System den Einfluss von Schlüsselfaktoren wie der NESDA-Reaktionstemperatur, Inkubationszeit, Konzentration der Matrizen-DNA sowie der Zugabe von Polymerase und Endonuklease auf das Detektionssignal. Die experimentellen Ergebnisse zeigten unter optimalen Bedingungen eine gute lineare Beziehung zwischen dem durchschnittlichen Durchmesser der Goldnanopartikel und der AFM1-Konzentration im Bereich von 8,3 bis 1000 pmol/L, mit einer Nachweisgrenze von bis zu 1,3 pmol/L. Die Methode wurde erfolgreich zur Detektion von AFM1 in handelsüblichen Milchproben angewendet, mit einer Wiederfindungsrate von 94,3 % bis 107 %, was die Zuverlässigkeit der praktischen Anwendung bestätigt und ein breites Anwendungspotenzial für die zukünftige Lebensmittelsicherheitsbewertung aufzeigt.

Aflatoxin M1; Kettenverdrängungs-Amplifikationstechnologie; dynamische Lichtstreuungstechnologie; Endonuklease; Goldnanopartikel; Milch