Präzise Analyse des Mutationszustands des HRAS-Genfragments, das eng mit der Frühdiagnose und Behandlung verschiedener menschlicher Krebserkrankungen verbunden ist. Diese Arbeit basiert auf einem im Labor entwickelten effizienten Kapillarelektrophoresesystem und kombiniert mit der räumlich kalibrierten quantitativen Analysemethode (SDIS). Nach der Überprüfung der Zuverlässigkeit, Stabilität und Genauigkeit wurde erfolgreich die gleichzeitige Erkennung und Analyse der Genfragmente an den Positionen 11 und 12 des HRAS-Gens durchgeführt. Die Ergebnisse zeigen, dass bei einer Konzentration des Trennmediums (HEC, 1300 K) von 1,0 % und einer elektrischen Feldstärke von 100 V/cm beide Genfragmente innerhalb von 6 Minuten mit guter Basislinienauflösung getrennt werden können, wobei die vom System gemessene relative Standardabweichung 2,5 % nicht überschreitet. Die Detektionskonzentrationen der beiden Fragmente weisen eine gute lineare Beziehung auf (Korrelationskoeffizient (r²) über 0,95), die Nachweisgrenzen (LOD) liegen bei 0,059 ng/μL bzw. 0,061 ng/μL. Im Vergleich zur herkömmlichen quantitativen Polymerase-Kettenreaktion (qPCR) und Sequenziertechnik bietet das eigens entwickelte System signifikante Vorteile hinsichtlich Kosten, Analysezeit und Portabilität der Ausrüstung. Durch die Integration der SDIS-Methode wurde eine hochsensitive gezielte Analyse der HRAS-Genfragmente erreicht.

Effiziente Kapillarelektrophorese; HRAS-Gen; SDIS-Methode; Genmutationsnachweis