Studie zur molekularen Analysenmethode des HRAS-Gens basierend auf der Hochleistungs-Kapillarelektrophorese-Technologie

SHU Meng-long ,  

YU Yang ,  

LIU Chang ,  

FENG Liang-jie ,  

SUN Yu ,  

YANG Jing ,  

WANG Feng-chao ,  

CHEN Jin ,  

摘要

Der Mutationsstatus des HRAS-Genfragments steht in engem Zusammenhang mit dem frühen Screening und der Behandlung verschiedener menschlicher Krebsarten. In diesem Artikel, basierend auf einem im Labor selbst entwickelten hochleistungsfähigen Kapillarelektrophoresesystem in Kombination mit der räumlichen Kalibrierungsmethode (SDIS), wurde nach Überprüfung der Zuverlässigkeit, Stabilität und Genauigkeit erfolgreich die gleichzeitige Detektion und Analyse der Codons 11 und 12 des HRAS-Genfragments durchgeführt. Die Ergebnisse zeigen, dass bei einer Konzentration des Trennmediums (HEC, 1 300 K) von 1,0 % und einer elektrischen Feldstärke von 100 V/cm die beiden Genfragmente innerhalb von 6 Minuten gut baselinie-aufgelöst werden können, wobei die relative Standardabweichung der Systemdetektion jeweils 2,5 % nicht überschreitet. Die Nachweis-Konzentrationen der beiden Fragmente weisen eine gute lineare Beziehung auf (Korrelationskoeffizient (r²) jeweils über 0,95), die Nachweisgrenzen (LOD) liegen bei 0,059 ng/μL und 0,061 ng/μL. Im Vergleich zu herkömmlicher quantitativer Polymerase-Kettenreaktion (qPCR) und Sequenzierungstechnik bietet das selbst entwickelte System deutliche Vorteile in Kosten, Analysezeit und Geräteportabilität. Durch die Integration der SDIS-Methode wurde eine hochempfindliche Zielanalyse des HRAS-Genfragments realisiert.

关键词

Hocheffiziente Kapillarelektrophorese;HRAS Gen;SDIS-Methode;Genmutationsnachweis

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