Markierungsfreier fluoreszenter Aptamer-Sensor basierend auf kompetitivem Thioflavin-T-Verschiebungsmechanismus für die schnelle Erkennung von hepatotoxischem Senecionin

CHEN Pei-yao ,  

XIE Lin-hui ,  

XIE Yang ,  

GONG Ting ,  

LUO Ying-ping ,  

摘要

Die schnelle Erkennung des hepatotoxischen Senecionin (SEN) ist entscheidend für die Lebensmittelsicherheit und die öffentliche Gesundheit. In dieser Studie wurde auf Basis eines zuvor isolierten SEN-spezifischen Nukleinsäure-Aptamers ein neuartiger, markierungsfreier fluoreszenter Aptamer-Sensor entwickelt. Das Konstruktionsprinzip beruht auf der spezifischen Bindung von Thioflavin T (ThT) an den Aptamer, wodurch ein starkes Fluoreszenzsignal erzeugt wird. Bei Anwesenheit des Zielstoffs SEN kann ThT kompetitiv verdrängt werden, was zu einer deutlichen Fluoreszenzabnahme (‚Signal-aus‘-Modus) führt. Der Sensor verfügt über eine hervorragende Screening-Fähigkeit für SEN mit einer Nachweisgrenze von bis zu 40 nmol/L. Die Proben können direkt unter blauem Licht beobachtet werden, hierbei ist die Spezifität hoch. In realen Honigproben zeigte die Methode weiterhin eine gute lineare Reaktion (0~10 μmol/L, r²=0,98), eine Nachweisgrenze von 414 nmol/L, eine Zugabewiederfindung von 99,2 % bis 103 % sowie eine relative Standardabweichung unter 3,0 %, was die Genauigkeit und Zuverlässigkeit der Anwendung in komplexen Matrizes bestätigt. Die Studie entwickelte eine neue, hochempfindliche, hochspezifische und einfach zu handhabende Methode zur SEN-Detektion und bietet eine vielversprechende technische Plattform für die schnelle Vor-Ort-Screening von pyrrolizidinalkaloid-Biotoxinen in Lebensmitteln und traditionellen Arzneimitteln.

关键词

Senecionin; Thioflavin T; fluoreszenter Sensor; Nukleinsäure-Aptamer

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