Markierungsfreier fluoreszierender Aptamersensor basierend auf kompetitiver Verdrängung von Thiazol Orange T zur schnellen Erkennung von hepatotoxischem Senecidin

CHEN Pei-yao ,  

XIE Lin-hui ,  

XIE Yang ,  

GONG Ting ,  

LUO Ying-ping ,  

摘要

Die schnelle Erkennung des hepatotoxischen Senecidins (SEN) ist entscheidend für die Lebensmittelsicherheit und den Gesundheitsschutz. In dieser Studie wurde basierend auf zuvor selektierten SEN-spezifischen Nukleinsäure-Aptameren ein neuartiger, markierungsfreier fluoreszierender Aptamersensor entwickelt. Das Kerndesign beruht auf der spezifischen Bindung von Thiazol Orange T (ThT) an den Aptamer, die ein starkes Fluoreszenzsignal erzeugt. In Anwesenheit des Ziel-SEN verdrängt dieser kompetitiv ThT, was zu einer deutlichen Verringerung der Fluoreszenz („Signalabschaltmodus“) führt. Der Sensor verfügt über eine exzellente SEN-Screening-Fähigkeit mit einer Nachweisgrenze von bis zu 40 nmol/L. Proben können zudem direkt unter Blaulicht beobachtet werden, wobei eine hohe Spezifität gewährleistet ist. In realen Honigproben weist die Methode eine gute lineare Reaktion (0~10 μmol/L, r² = 0,98) auf, die Nachweisgrenze liegt bei 414 nmol/L, die Zusatzrückgewinnung beträgt 99,2%~103%, und die relative Standardabweichung liegt unter 3,0%. Dies bestätigt die Genauigkeit und Zuverlässigkeit in komplexen Matrizen. Die Studie entwickelte eine neue Methode zur SEN-Erkennung mit hoher Sensitivität, Spezifität und einfacher Handhabung und bietet eine vielversprechende technologische Plattform für das schnelle Vor-Ort-Screening von Pyrrolizidinalkaloid-Biotoxinen in Lebensmitteln und chinesischen Heilkräutern.

关键词

Senecidin; Thiazol Orange T; fluoreszenter Sensor; Nukleinsäure-Aptamere

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