Es wurde eine Methode mittels Ultra-Performance-Flüssigkeitschromatographie gekoppelt mit Tandem-Massenspektrometrie (UPLC-MS/MS) zur Bestimmung von fünf endogenen Metaboliten im Serum von immununterdrückten Ratten, die durch Cyclophosphamid verursacht wurden, entwickelt: Glutathion (GSH), DL-Glutamin (DL-Gln), Glutaminsäure (GA), 1-O-Hexadecyl-sn-Glycero-3-phosphocholin (LPC (o-16∶0)) und Arachidonsäure (AA). Serumproben wurden nach Protein-Fällung mit einer ACQUITY Poroshell 120 SB-C18 Säule (2,1 mm × 100 mm, 2,7 µm) unter Verwendung einer Methanol-5 mmol·L^-1 Ammoniumacetatlösung als Laufmittel im Gradienten für die Bestimmung von GSH, DL-Gln, GA und AA eluieren; zur Bestimmung von LPC (o-16∶0) wurde eine ACQUITY UPLC BEH Amide Säule (2,1 mm × 150 mm, 1,7 µm) mit einer Acetonitril-5 mmol·L^-1 Ammoniumformatlösung als Laufmittel im Gradienten verwendet. Die Massenspektrometrie erfolgte mit Elektrospray-Ionisation (ESI) im positiven und negativen Ionenmodus und quantitativer Analyse mittels interner Standardmethode. Die Ergebnisse zeigten für die fünf Metaboliten gute lineare Zusammenhänge im jeweiligen Konzentrationsbereich (r > 0,995), Nachweisgrenzen von 0,024 bis 0,561 ng·mL^-1 und Bestimmungsgrenzen von 0,145 bis 0,592 ng·mL^-1. Die Methode ist einfach, schnell, sensitiv und eignet sich zur Bestimmung endogener Metaboliten im Ratserum und bietet eine experimentelle Grundlage zur Erforschung der Wirkmechanismen immunsuppressiver Medikamente.

Ultra-Performance-Flüssigkeitschromatographie gekoppelt an Tandem-Massenspektrometrie; Serum; endogene Metaboliten; Immunfunktionshemmung