Es wurde eine Methode zur Bestimmung von fünf endogenen Metaboliten im Serum von Ratten mit durch Cyclophosphamid induzierter Immunsuppression mittels ultrahochleistungsflüssigkeitschromatographie gekoppelt mit Tandem-Massenspektrometrie (UPLC-MS/MS) etabliert: Glutathion (GSH), DL-Glutamin (DL-Gln), Glutaminsäure (GA), 1-O-Hexadecyl-sn-Glycerophosphocholin (LPC(0-16∶0)) und Arachidonsäure (AA). Nach Proteinfällung der Serumproben wurde eine ACQUITY Poroshell 120 SB-C₁₈-Säule (2,1 mm × 100 mm, 2,7 µm) mit Methanol und 5 mmol·L^-1 Ammoniumacetat als mobile Phase für den Gradienten eluiert, um GSH, DL-Gln, GA und AA zu bestimmen; und eine ACQUITY UPLC BEH Amide-Säule (2,1 mm × 150 mm, 1,7 µm) mit Acetonitril und 5 mmol·L^-1 Ammoniumformat als mobile Phase für den Gradienten eluiert, um LPC(0-16∶0) zu bestimmen. Die Massenspektrometrie wurde mit einer Elektrospray-Ionisationsquelle (ESI) im Positiv- und Negativionenmodus unter Verwendung der internen Standardmethode zur Quantifizierung durchgeführt. Die Ergebnisse zeigten für alle fünf Metaboliten gute Linearitäten im jeweiligen Konzentrationsbereich (r > 0,995), Nachweisgrenzen von 0,043 bis 0,178 ng·mL^-1 und Quantifizierungsgrenzen von 0,145 bis 0,592 ng·mL^-1. Die Methode ist einfach, schnell und hochsensitiv und eignet sich zur Bestimmung endogener Metaboliten im Rattensserum und bietet eine experimentelle Grundlage für die Erforschung des Wirkmechanismus immunsuppressiver Medikamente.

ultrahochleistungsflüssigkeitschromatographie gekoppelt mit Tandem-Massenspektrometrie; Serum; endogene Metaboliten; Immunfunktionshemmung