Als Reaktion auf den Bedarf an schneller und hochempfindlicher Erkennung von Fluazinam wurde in dieser Studie ein systematischer Vergleich von vier bekannten Aptamer-Sequenzen durchgeführt, wobei das Aptamer mit der besten Affinität zu Fluazinam ausgewählt wurde. Basierend darauf wurde unter Verwendung der spezifischen Hydrolyse von Einzelstrang-DNA durch Nuklease I (Exonuclease I, ExoⅠ) und der signifikanten Fluoreszenzverstärkung durch die Aggregationsinduzierten Emissions (AIE)-Moleküle 4,4′-(IE,I′E)-2,2′-(Anthracen-9,10-diphenyl) Doppel (Ethylen-2,1-diyl) Doppel (N,N-dimethylanilin) (DSAI) nach Bindung an das Aptamer eine empfindliche Fluoreszenznachweismethode für Fluazinam entwickelt. Der lineare Nachweisbereich für Fluazinam lag bei 1,00~12,50 nmol/L, mit einer Nachweisgrenze von 2,23 nmol/L. Bei der Analyse realer Proben (Kohl, Mais und Leitungswasser) lag die mittlere Rückgewinnungsrate bei 89,2 %~107 % mit einer relativen Standardabweichung von 0,80 %~4,3 %. Die Ergebnisse zeigen, dass der entwickelte Sensor eine hohe Empfindlichkeit und gute Selektivität aufweist und somit ein gutes Anwendungspotenzial im Bereich der schnellen Rückstandsprüfung von Pestiziden besitzt.