Dualmodus-FL/ECL-Sensor basierend auf der selbstkatalytischen Assemblierung von DNAzymen zur hochempfindlichen Identifizierung der Echtheit von Ginseng

LIAO Hui ,  

YANG Hong-xia ,  

ZHANG Lu ,  

ZHANG Jing ,  

YIN Zhao-jiang ,  

WANG Mei ,  

CUI Han-feng ,  

摘要

Um das Problem zu lösen, dass herkömmliche Methoden zur Identifizierung von Ginseng-Genen teure Geräte erfordern und eine unzureichende Empfindlichkeit aufweisen, wurde in dieser Arbeit ein dualmodaler Sensor basierend auf der selbstkatalytischen Assemblierung von DNAzymen zur effizienten Erkennung ginsengspezifischer Gene entwickelt. Der Sensor verwendet synthetisches Ruthenium-basiertes kovalentes organisches Gerüst@Ethylendiamintetraessigsäure (RuCOFs@EDTA) als Basismaterial für Fluoreszenz (FL) und elektrochemische Chemilumineszenz (ECL) und kombiniert die katalytische Haarnadel-Assemblierungsstrategie (CHA) mit der dualen katalytischen DNA-Molekülstrategie (DNAzyme), um einen doppelten Signalverstärkungsmechanismus „Assemblierung-Katalyse“ zu etablieren. Das ginsengspezifische Gen löst die CHA-Reaktion aus, wobei eine hantelförmige Doppel-DNAzym-Struktur gebildet wird, die ihre katalytische Aktivität aktiviert, die Substratsonde mit Doppel-Ferrocen-markierung spaltet, das Signalquenching aufhebt und gleichzeitig die FL- und ECL-Signale wiederherstellt. Im Zielgen-Konzentrationsbereich von 5×10^-16 bis 5×10^-11 mol/L liegen die Nachweisgrenzen für FL- und ECL-Modi bei 0,24 fmol/L bzw. 0,09 fmol/L mit ausgezeichneter Selektivität und Reproduzierbarkeit. Bei der Analyse realer Ginseng-DNA-Proben liegt die Rücklaufquote zwischen 97,3 % und 103 %, was ein praktisches Anwendungspotenzial aufzeigt. Der Sensor ist unabhängig von PCR-Geräten, vereint hohe Empfindlichkeit, hohe Spezifität und Benutzerfreundlichkeit und bietet ein neues technisches Mittel zur molekularen Authentifizierungsuntersuchung von Ginseng und anderen chinesischen Kräutern.

关键词

DNAzyme-Selbstassemblierung;Dualmodus-Sensor;Ginseng;Echtheitsbestimmung

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