Quantitative Bestimmung von 26 Gallensäuren im Serum mittels Ultra-Hochleistungsflüssigkeitschromatographie–hochauflösender Massenspektrometrie

GUO Min ,  

ZHANG Zhi-hua ,  

YANG Qin ,  

WANG Gang ,  

WANG Lin-lin ,  

ZHAO Jian-xin ,  

摘要

In dieser Studie wurde eine Methode zur gleichzeitigen Analyse von 26 Gallensäuren im Serum mittels Ultra-Hochleistungsflüssigkeitschromatographie gekoppelt mit hochauflösender Massenspektrometrie (UPLC-HRMS) etabliert. Nach einer Protein-Fällung als Probenvorbereitung wurde eine Phenomenex Kinetex C18-Säule (2,1 mm × 100 mm, 2,6 μm) zur Trennung verwendet, mit einem Gradienten-Elutionsverfahren aus 5 mmol/L Ammoniumacetat-Wasserlösung und Methanol als mobile Phase. Die Datenerfassung erfolgte im negativen Elektrosprayionisationsmodus, die Quantifizierung wurde mittels externer Standards durchgeführt. Die methodische Validierung zeigte für 26 Gallensäuren eine gute Linearität im Bereich von 0,04 bis 1163,5 ng/mL mit Korrelationskoeffizienten (r2) von mindestens 0,9990. Die Nachweisgrenzen lagen zwischen 0,01 und 0,86 ng/mL, die Quantifizierungsgrenzen zwischen 0,04 und 2,22 μg/mL, die Wiederfindungsraten zwischen 68,1 % und 99,8 % und die relativen Standardabweichungen zwischen 0,10 % und 10 %. Diese Methode ist zur genauen Bestimmung des Gallensäure-Gehalts in Serumproben verschiedener Herkunft geeignet und kann eine zuverlässige methodische Unterstützung für die Erforschung des Gallensäurestoffwechsels sowie die Auswahl von krankheitsbezogenen Biomarkern bieten.

关键词

Serum;Gallensäuren;UPLC-HRMS;quantitative Analyse

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