Es wurde eine Methode der Hochleistungsflüssigkeitschromatographie gekoppelt mit Tandem-Massenspektrometrie zur gleichzeitigen Bestimmung von Spiramycin I und seinen Metaboliten (neues Spiramycin I) in Muskelgewebe, Organen und Milch von Nutztieren entwickelt. Die Proben wurden mit Tris(hydroxymethyl)aminomethan (Tris)-Lösung extrahiert, Proteine mit Metaphosphatlösung ausgefällt, mit einer HLB-Säule gereinigt und auf einer C₁₈-Chromatographiesäule (100 mm×2,1 mm, 2,7 μm) getrennt. Die Elution erfolgte gradientenförmig mit Acetonitril und 0,1%iger Ameisensäurelösung. Die Detektion wurde mittels Elektrospray-Ionisationsquelle im positiven Ionenmodus im Mehrfachreaktions-Monitoring (MRM) durchgeführt, die Quantifizierung erfolgte mittels Externstandard-Methode. Es wurden die Einflüsse des Extraktionsmittels, der Festphasenextraktionssäule und des pH-Werts auf die Wiederfindungsraten untersucht sowie die chromatographischen Bedingungen und Massenspektrometerparameter optimiert. Die Ergebnisse zeigten im Bereich von 0,2 bis 20,0 μg/L eine gute Linearität mit Korrelationskoeffizienten (r) über 0,999. Die Nachweisgrenze lag bei 10 μg/kg, die Quantifizierungsgrenze bei 50 μg/kg. Bei Anreicherungen von 50 bis 600 μg/kg lagen die mittleren Wiederfindungsraten von Spiramycin I und seinen Metaboliten zwischen 71,8 % und 102 %, mit relativer Standardabweichung von 1,7 % bis 8,5 %. Die Methode erfüllt die Anforderungen der physikalisch-chemischen Lebensmittelanalyse und eignet sich für die gleichzeitige Bestimmung von Spiramycin I und seinen Metaboliten in Muskelgewebe, Organen und Milch von Nutztieren.

Spiramycin I; Metaboliten; Festphasenextraktion; Hochleistungsflüssigkeitschromatographie-Tandem-Massenspektrometrie