Visuelle Rekombinase-Polymerase-Amplifikationsmethode basierend auf dem Lichts chalter eines Nukleinsäuremoleküls

DENG Fan ,  

SUN Na-na ,  

ZHOU Kai-yue ,  

LIU Jiang-hua ,  

LI Guo-liang ,  

XU Qin-feng ,  

FENG Xia ,  

摘要

In dieser Studie wird das Nukleinsäuremolekül "Lichtschalter" [Ru(bpy)2(dppz)]2+ als fluoreszierender Farbstoff für die Echtzeit-Fluoreszenz-RPA-Amplifikation verwendet, wodurch eine einfache und multiple Echtzeit-Fluoreszenz-RPA-Amplifikation von lebensmittelbedingten Krankheitserregern (wie Staphylococcus aureus (S.aur) und Salmonellen (S.spp)) erreicht wird. Darüber hinaus wurde auf der Basis von [Ru(bpy)2(dppz)]2+ eine schnelle, visuelle RPA-Nachweismethode entwickelt, die das Amplifikationsergebnis durch direkte Beobachtung des starken roten Fluoreszenzsignals unter sichtbarem Licht nach Bindung des amplifizierten DNA-Produkts mit [Ru(bpy)2(dppz)]2+ bestimmt. Dadurch wird eine deutliche Hemmung der Amplifikationsreaktion durch hohe Konzentrationen von [Ru(bpy)2(dppz)]2+ vermieden. Die Methode bietet eine gute Visualisierung, hohe Spezifität und hohe Sensitivität und hat das Potenzial für eine breite Anwendung in der Umweltüberwachung, Lebensmittelsicherheit und der schnellen klinischen Nukleinsäurediagnostik vor Ort.

关键词

Rekombinase-Polymerase-Amplifikation (RPA); [Ru(bpy)2(dppz)]2+; visuelle Detektion; Staphylococcus aureus

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