Bestimmung von 37 Aminosäuren im Serum mittels Flüssigchromatographie-Tandem-Massenspektrometrie

ZHAO Yun-xia ,  

LI Zi-ying ,  

CHEN Xin ,  

ZHANG Yu-xin ,  

XIAO Wei-min ,  

LIU Ai-ping ,  

LI Mei-fang ,  

JIN Yi-bao ,  

DU Qing-ping ,  

WANG Qi ,  

SU Jia-ting ,  

YANG Guo-wu ,  

FANG Wen ,  

摘要

Es wurde eine quantifizierende Methode zur Analyse von 37 Aminosäuren im Serum mittels Flüssigchromatographie gekoppelt mit Tandem-Massenspektrometrie (LC-MS/MS) etabliert. Nach Proteinpräzipitation mit einer 10 %igen wässrigen Lösung von Sulfosalizylsäure wurden die Proben auf einer Phenomenex Kinetex F5-Säule (250 mm × 4,6 mm, 5 μm) getrennt, wobei eine mobile Phase mit 0,02 % Ameisensäure in Wasser und Acetonitril im Gradienten eluiert wurde. Die Detektion erfolgte im positiven Elektrospray-Ionisationsmodus (ESI) und im Mehrfachreaktionsüberwachungsmodus (MRM). Die Methode wurde methodisch validiert; die Ergebnisse zeigten für die 37 Aminosäuren eine gute Linearität im Bereich vom Nachweisgrenzwert bis 1000 ng/mL, mit Korrelationskoeffizienten über 0,999, Retentionszeiten von 4,60 bis 9,16 min, Nachweisgrenzen von 0,2 bis 10,0 ng/mL und Quantifizierungsgrenzen von 0,5 bis 20,0 ng/mL. Die mittlere Wiederfindungsrate bei verschiedenen Zugabekonzentrationen lag zwischen 83,2 % und 118 %, die relative Standardabweichung zwischen 0,90 % und 9,4 %. Die Methode wurde bei 49 Serumproben angewendet; Carnosin und Cystein wurden nicht nachgewiesen, die Nachweisrate für Homocystein betrug 10,20 %, während die für die übrigen 34 Aminosäuren über 90 % lag. Die Methode zeichnet sich durch hohe Genauigkeit, Sensitivität und Spezifität aus und kann zur Bestimmung des Aminosäuregehalts in Serumproben verwendet werden, wodurch umfassendere Daten für krankheiten im Zusammenhang mit Aminosäurestoffwechselstörungen bereitgestellt werden.

关键词

Flüssigchromatographie-Tandem-Massenspektrometrie;Aminosäuren;Serum;Sulfosalicylsäure

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