Eine quantitative Durchfluss-Fluoreszenz-Immunassay-Methode zur Bestimmung des Penicillinsäuregehalts (BA) wurde entwickelt. Zunächst wurde durch die Synthese des vollständigen Antigens BA-BSA ein hochaffines monoklonales Anti-BA-Antikörperimmunsystem erhalten. Anschließend wurde das synthetisierte BA-BSA-Antigen mit Phycoerythrin markiert und konkurrierte mit BA in der Probe um die Bindung an monoklonale Anti-BA-Antikörper, die mit fluoreszenten Mikrosphären konjugiert waren. Durch Messung der mittleren Fluoreszenzintensität auf der Oberfläche der Mikrosphären mittels Durchfluss-Fluoreszenzgerät konnte die BA-Menge in der Probe quantifiziert werden. Der lineare Bereich für BA betrug 1,01 bis 97,96 μg/L, die halbmaximale Hemmkonzentration (IC₅₀) lag bei 9,92 μg/L, der Korrelationskoeffizient (r²) betrug 0,9998, und die Nachweisgrenze lag bei 0,56 μg/kg. Die Anreicherungsrate lag bei 90,4 % bis 104 %, die relative Standardabweichung betrug 5,0 % bis 9,8 %. Die Methode zeigte eine gute Spezifität mit Kreuzreaktionen von weniger als 0,1 % gegenüber Ochratoxin A, Aflatoxin B1, Aflatoxin M1, Fumonisin B1 und Fumonisin B2. Die Ergebnisse der tatsächlichen Proben stimmten mit denen der Hochleistungsflüssigkeitschromatographie in Verbindung mit Tandem-Massenspektrometrie überein. Die etablierte Durchfluss-Fluoreszenz-Immunmethode ist einfach, schnell, empfindlich und genau und kann auf die Analyse und den Nachweis anderer Mykotoxine in verschiedenen komplexen Lebensmittelmatrizen ausgeweitet werden.

Durchfluss-Fluoreszenz-Immunmethode; Penicillinsäure; Antigen; Antikörper; Lebensmittelsicherheit