Die kalibrierfreie Konzentrationsanalyse (CFCA) basierend auf der Oberflächenplasmonresonanztechnologie (SPR) ermöglicht die Messung der aktiven Proteinkonzentration ohne Verwendung von Standardproben, indem nur bekannte Protein-Diffusionskoeffizienten und die Messung der aktiven Konzentration unter diffusionsbegrenzten Bedingungen verwendet werden. Diese Studie schlägt eine CFCA-Methode in Fangform (CCFCA) zur Bestimmung der aktiven Konzentration des Proteins CYFRA21-1 vor. Die Ergebnisse zeigen, dass die mit der CCFCA-Methode ermittelten Werte 0,67 mg/mL mit einer Tagespräzision von 4,6 % betragen, während die Werte mit der CFCA-Methode 0,7 mg/mL mit einer Tagespräzision von 6,5 % liegen. Darüber hinaus war das Antikörper-Kopplungsniveau stets ein kritischer Faktor, der die Verwendung der CFCA-Methode einschränkte; unsachgemäße Lagerungs- oder Aktivierungsmethoden des Chips führen dazu, dass das Niveau der Antikörperkopplung auf der Chip-Oberfläche nicht die Anforderungen zur Überwindung von Massentransportbeschränkungen der CFCA-Methode (methodische Anforderungen QC_ratio>0,2) erfüllt, was die Messergebnisse unzuverlässig macht. Da die Fangmethode mithilfe von Protein G eine räumlich günstigere Ausrichtung der Antikörper bewirkt, sind die CCFCA-Ergebnisse auch bei niedrigem Kopplungsniveau genau und stabil. Im Vergleich zur klassischen CFCA-Methode sind die CCFCA-Ergebnisse zuverlässig, und ein einzelner Chip kann nach Regeneration für mehrere Antikörper-Analyten-Tests verwendet werden, was sie zu einer besseren Wahl für zukünftige Messungen der aktiven Proteinkonzentration macht.

Kalibrierfreie Quantifizierung;CYFRA21-1;Aktive Proteinkonzentration;Fangmethode