Durch Ultraschallextraktion mit alkalischer Methanollösung in Kombination mit β-Glucosidase-hydrolyse aus Mandel und dispersiver Festphasenextraktion mit Polyamid wurde eine Methode zur Bestimmung der gesamten aktiven Isoflavonmenge in Soja mittels Ultrahochleistungsflüssigkeitschromatographie entwickelt. Malonyl- und Acetyl-Isoflavonglykoside in der Probe werden unter alkalischen Bedingungen zu Basistyp-Glykosiden hydrolysiert und unter Einwirkung der β-Glucosidase weiter zu den entsprechenden Aglykonen umgesetzt. Zwölf verschiedene Isoflavonformen in der Probe werden in nur drei Isoflavonaglykone (Daidzein, Genistein, Glycitein) umgewandelt, gefolgt von dispersiver Festphasenextraktion mit Polyamidpulver und Trennung auf einer C18-Reversed-Phase-Säule (2,1 mm i.d.×50 mm, 1,8 µm). Die Ergebnisse zeigen, dass Daidzein, Genistein und Glycitein innerhalb von 3 Minuten eine Basislinien-Trennung erreichen; die Korrelationskoeffizienten (r2) der Standardkurven aller drei Aglykone liegen über 0,999; die Gesamtrückgewinnung der Isoflavone beträgt 94,3 % bis 102 %, die relative Standardabweichung (RSD, n=6) liegt unter 5,0 %, was eine hohe Genauigkeit und Präzision bestätigt. Die Methode berechnet die Gesamtmenge der Isoflavone durch Bestimmung aller Aglykone in der Probe und reduziert so Herausforderungen bezüglich Trennung, Genauigkeit und Kosten der Messung. Unter Berücksichtigung der Umwandlungs- und physiologischen Absorptionsmechanismen von Isoflavonen im Körper spiegelt die Summe der Aglykone wissenschaftlicher den tatsächlichen Aktivitätsgrad der Isoflavone wider und vermeidet eine Überschätzung, die durch einfache Addition von Glycosiden und Aglykonen entstehen kann.

Soja-Isoflavone;Polyamid (PA);Dispersive Festphasenextraktion (d-SPE);β-Glucosidase;Ultrahochleistungsflüssigkeitschromatographie (UPLC)