Untersuchung der Bedingungen für SHG-Bildgebung mit dem Zwei-Photonen-Mikroskop und deren Anwendung

HAN Qin ,  

WU Hang-jun ,  

WU Ling-yun ,  

SONG Dan-dan ,  

摘要

Die Erzeugung der zweiten Harmonischen (SHG) wird in vielen Disziplinen aufgrund ihrer Vorteile wie Markierungsfreiheit, niedriger Phototoxizität und Empfindlichkeit gegenüber der Materialstruktur eingesetzt. In dieser Arbeit wurde die Haut lebender Mäuse als Modell verwendet, um die Bedingungen der SHG-Bildgebung mit einem Zwei-Photonen-Mikroskop zu untersuchen. Glycerin wurde als Klärmittel verwendet; die SHG-Signalstärke und Eindringtiefe der mit Glycerin bzw. Wasser behandelten Haut wurden statistisch ausgewertet. Zwischen der Glycerin-behandelten und Wasser-behandelten Gruppe gab es signifikante Unterschiede bei SHG-Signalstärke und Eindringtiefe (*p ≤ 0,05), was beweist, dass Glycerin ein effizientes Klärmittel für in vivo-Hautexperimente ist. Unter Berücksichtigung der Laserleistung, der sponta­nen Fluoreszenzeigenschaften von biologischem Gewebe und der Eindringtiefe wurde die optimale Anregungswellenlänge für SHG-Bildgebung mit dem Zwei-Photonen-Mikroskop mit 900 nm bestimmt. Die Verwendung von Glycerin-Klärung und optimaler Anregungswellenlänge ermöglichte die Aufzeichnung von SHG-Signalen der Tumorhaut und eine in vivo-Beobachtung der Auswirkungen des Tumors auf die Kollagenfaserstruktur der Haut. Die Ergebnisse zeigen, dass das Zwei-Photonen-Mikroskop effektiv SHG-Bildgebung durchführen kann und eine in vivo-Beobachtung und Visualisierung der Kollagenfaserstrukturen im Organismus ermöglicht.

关键词

Zwei-Photonen-Mikroskop;Erzeugung der zweiten Harmonischen;Tumor;Kollagen

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