الكروماتوغرافيا السائلة فائقة الكفاءة-مطيافية الكتلة الثنائية المتسلسلة لتحديد 12 نيوكليوزيداً طبيعياً ومعدلاً في mRNA لخلايا الأورام (بالإنجليزية)
摘要
تم تطوير طريقة تحليل لـ 12 نوعًا من النيوكليوزيدات الطبيعية والمعدلة في mRNA لخلايا الأورام. بعد استخراج إجمالي RNA من عينات خلايا الأورام وتنقية mRNA وتحلل mRNA، أضيف 8-بروموجوانينين (8Br-G) كمادة معيار داخلية، باستخدام ماء بحمض الفورميك 0.1% وميثانول بحمض الفورميك 0.1% كمراحل متحركة، تم فصل المركبات بواسطة عمود كروماتوغرافي Agilent RRHD SB-C18 (2.1 مم×50 مم، 1.8 ميكرومتر)، مع مصدر تأيين رش بالكهرباء ووضع مسح أيونات موجبة (ESI+)، ونمط مراقبة ردود الفعل المتعددة (MRM). تتوافق الطريقة مع متطلبات التحقق المنهجي، حيث أظهرت النيوكليوزيدات الطبيعية والمعدلة علاقة خطية جيدة ضمن نطاق تركيز محدد، وكانت معاملات الارتباط (r) أكثر من 0.99، وحدود الكمية (LOQ) من 0.17 إلى 3.13 نانوغرام/مل، وحدود الكشف (LOD) من 0.08 إلى 1.56 نانوغرام/مل. تم تطبيق الطريقة المطورة على خطوط خلايا سرطان الأنف البلعومي 5-8F، وسرطان عنق الرحم Hela، وخلايا الكلية البشرية الناضجة 293T، وتم الكشف بنجاح عن مستويات متعددة من النيوكليوزيدات المعدلة. تستهلك الطريقة كمية قليلة من الخلايا (2×10^6 لكل عينة)، زمن تحليل قصير (6 دقائق لكل عينة)، وحساسية عالية، مما يوفر طريقة تحليل فعالة لأبحاث السرطان والتشخيص السريري.
关键词
نيوكليوزيد; نيوكليوزيد معدل; mRNA; خلايا الأورام; الكروماتوغرافيا السائلة فائقة الكفاءة-مطيافية الكتلة الثنائية المتسلسلة (UPLC-MS/MS)
以上内容由讯飞翻译自动生成，翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果，本网站不承担任何商业和法律责任。
The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website