غالبًا ما تواجه المختبرات الروتينية صعوبات في تجهيز عينات المجهر الإلكتروني الماسح (SEM) للكائنات الدقيقة بسبب نقص مواد التثبيت ومعدات التجفيف عند النقطة الحرجة. لحل هذه المشكلة، تم اختيار برمنجنات البوتاسيوم (KMnO₄) كمادة مثبتة للخلايا، وتم تحسين وتحليل طرق التحضير المتعلقة بعمليتي التثبيت والتجفيف في تحضير عينات SEM، بهدف تأسيس طريقة تحضير آمنة، اقتصادية، ومنخفضة الاعتماد على المعدات لعينات SEM للكائنات الدقيقة. تم استخدام الإشريكية القولونية، العصية الخشبية، والخميرة الجافة ككائنات دراسية، حيث خضعت الخلايا لثبات أحادي باستخدام الغلوتارالدهيد (GA)، وثبات مزدوج بغسول الغلوتارالدهيد-تتراكسيد الأوزميوم (GA-OT)، وثبات مزدوج بغسول الغلوتارالدهيد- برمنجنات البوتاسيوم (GA-PP)، وتم تصنيف وتجهيز العينات بواسطة التجفيف بالتجميد، التجفيف الطبيعي، التجفيف بالحرارة منخفضة الحرارة، التجفيف بالحرارة متوسطة-منخفضة، والتجفيف عند النقطة الحرجة، ثم تم التصوير بواسطة SEM لمقارنة تأثير المعالجات على شكل وسلامة الخلايا. أظهرت النتائج أن الثبات باستخدام GA-OT وGA-PP كانا أكثر فعالية في الحفاظ على شكل الخلايا مقارنة بالثبات باستخدام GA فقط؛ كما أن التجفيف بالتجميد والتجفيف عند النقطة الحرجة حافظا بشكل جيد على الشكل الطبيعي للخلايا. طريقة GA-PP مع التجفيف بالتجميد تمكن من الحفاظ على البنية الشكلية لنوعيات مختلفة من الكائنات الدقيقة (البكتيريا سالبة وموجبة الجرام والخمائر أحادية الخلية)، مما يلبي متطلبات التصوير بـSEM، ويتميز بكونه اقتصاديًا، متعدد الاستخدامات، آمنًا، وله قيمة تطبيقية عالية ويوفر حلاً بديلاً عمليًا لمختبرات الروتين لتحضير عينات SEM للكائنات الدقيقة.

الكائنات الدقيقة; تحضير عينات SEM; تثبيت مزدوج غلوتارالدهيد-KMnO₄; التجفيف