يوفر تسلسل النسخ الخلوي الفردي (scRNA-seq) دقة غير مسبوقة في تصوير التغاير الخلوي، ومع ذلك تواجه الطرق التقليدية لتسلسل scRNA فقدانًا عاليًا للخلايا، وتلوثًا بالخلايا المضاعفة (Doublets)، وتكلفة مرتفعة. لحل هذه القيود، طور هذا البحث طريقة Well-Multi-seq. من خلال الجمع بين رقاقة ميكروية متداخلة تعتمد على ازدواج الحجم والتقاط تدفق ساكن شبه ثابت، واستراتيجية الوسم باستخدام أحماض أولايغنوكليوتيد معدلة بالكوليسترول، تم تحقيق كفاءة عالية في التقاط الخلايا، تلوث منخفض، وتكلفة منخفضة لتسلسل النسخ الخلوي الفردي المختلط لعينات متعددة. باستخدام الرقاقة الميكروية المتداخلة، تغلبت الدراسة على قيود توزيع بواسون، محققة احتلالًا بمعدل 94% للخرزات الدقيقة، و74% للخلايا، و87% لالتقاط الخلايا، مما عزز بشكل كبير من استخدام الخلايا والميكروحويصلات. من خلال خاصية الإدخال المستقر لجزيء الكوليسترول في غشاء الخلية، تم تثبيت سلاسل أحماض أولايغنوكليوتيد الموسومة برموز العينات على سطح الخلية، مما أتاح خلط و تسلسل عينات متعددة في أنبوب واحد. لا تقلل هذه الاستراتيجية من تكلفة الكواشف وتبسط سير العمل فقط، بل تمنح القدرة على التعرف على وإزالة التلوث بالخلايا المضاعفة في المكتبة. في تسلسل مختلط من خطوط خلايا بشرية وفئران، بلغت دقة وسم العينات في هذه الطريقة 92.60% (بشر) و95.28% (فئران)، مما يثبت خصوصية الوسم الممتازة. بفضل المزايا المتعددة لطريقة Well-Multi-seq، فإن لها قيمة تطبيقية محتملة في أنواع الخلايا النادرة مثل الخلايا الورمية الدّائرة، عينات الخزعة بالإبر الدقيقة، وكذلك في تحليل العمليات الديناميكية مثل فحص الأدوية وتطور الجنين، مما يجعلها أداة قوية للبحث الأساسي والتشخيص السريري.

تسلسل خلوي فردي;رقاقة تدفق ميكروي؛ وسم متعدد العينات؛ وسم معدل بالكوليسترول