يوفر تسلسل الرنا المعبر الفردي الخلوي (scRNA-seq) دقة غير مسبوقة لوصف التغاير الخلوي، ومع ذلك فإن طرق scRNA-seq التقليدية تواجه قيودًا مثل معدل فقدان الخلايا العالي، تلوث الخلايا المزدوجة (Doublets)، وتكاليف عالية. لحل هذه القضايا، طور هذا البحث طريقة Well-Multi-seq. تجمع هذه الطريقة بين شرائح ميكرو孔 المتداخلة التي تعتمد على استبعاد الحجم والتقاط السوائل شبه الساكن بالإضافة إلى استراتيجية وسم بواسطة تتابعات أوليغنوكليوتيد معدلة بالكوليسترول، لتحقيق كفاءة عالية في التقاط الخلايا، تلوث منخفض وتكلفة منخفضة لتسلسل رنا خلايا متعددة العينات. باستخدام شريحة الميكرو孔 المتداخلة، تم تجاوز قيود التوزيع بواسون، محققًا نسبة احتلال 94% للجسيمات الدقيقة، 79% للخلايا و87% لمعدل التقاط الخلايا، مما عزز بشكل ملحوظ من استخدام الخلايا والميكروغرف. بفضل الخاصية المستقرة للكوليسترول في دمج غشاء الخلية، تم تثبيت السلاسل الأوليغنوكليوتيدية المشفرة للعينة على سطح الخلية، مما مكن من تسلسل المختلط لعينة متعددة في أنبوب واحد. لم تقلل هذه الاستراتيجية بشكل كبير من تكلفة المواد الكيميائية المباشرة وتبسيط إجراءات التجارب فحسب، بل وفرت القدرة على التعرف وإزالة تلوث الخلايا المزدوجة من المكتبة. في تسلسل العينات المختلطة للخلايا البشرية والفأرية، بلغت دقة وسم العينات 97.1% (بشر) و98.9% (فأر)، مما يثبت تفرد التسمية. بفضل مزايا Well-Multi-seq المتعددة، تتمتع الطريقة بقيمة تطبيقية محتملة في أنواع الخلايا النادرة مثل الخلايا الورمية الدائرة وعينات الخزعة بالإبر الدقيقة، وكذلك في تحليل العمليات الديناميكية مثل فحص الأدوية وتطور الأجنة، مما يجعلها أداة قوية للبحث الأساسي والتشخيص السريري.

تسلسل الخلية الواحدة;رقائق التحكم الميكروي;وسم العينات المتعدد;وسوم معدلة بالكوليسترول