تحديد خمس مستقلبات داخلية في مصل الفئران المصابة بقمع المناعة الناتج عن سايكلوفوسفاميد باستخدام التحليل الكروماتوجرافي السائل عالي الأداء للغاية المزدوج مع مطياف الكتلة
تم تطوير طريقة تحليل خمس مستقلبات داخل الجسم في مصل الفئران المعرضة لقمع المناعة الناتج عن سايكلوفوسفاميد باستخدام مطيافية الكتلة المتسلسلة المقترنة بالفصل اللوني عالي الأداء للغاية (UPLC-MS/MS). تم ترسيب البروتينات من عينات المصل، واستخدام عمود كروماتوغرافي ACQUITY Poroshell 120 SB-C18 (2.1 ملم × 100 ملم، 2.7 ميكرومتر) مع طور متحرك من ميثانول ومحلول أسيتات الأمونيوم 5 ملمول/لتر عبر التدرج لفصل GSH وDL-Gln وGA وAA؛ واستخدام عمود ACQUITY UPLC BEH Amide (2.1 ملم × 150 ملم، 1.7 ميكرومتر) مع طور متحرك من أسيتونيتريل ومحلول فورمات الأمونيوم 5 ملمول/لتر للتدرج لفصل LPC (o-16∶0). استخدم المصدر الأيوني بالتنقيط الكهربائي (ESI) في نمطي الأيونات الموجبة والسالبة مع طريقة المؤشر الداخلي للكمية. أظهرت النتائج أن المستقلبات الخمسة أظهرت علاقات خطية جيدة ضمن نطاقات التركيز الكتلي المعني (r > 0.995)، مع حدود كشف بين 0.024 إلى 0.561 نانوغرام/مل، وحدود تحديد بين 0.145 إلى 0.592 نانوغرام/مل. هذه الطريقة بسيطة وسريعة وعالية الحساسية ومناسبة لتحديد المستقلبات الذاتية في مصل الفئران، مما يوفر أساسًا تجريبيًا لدراسة آلية عمل أدوية لعلاج قمع المناعة.
关键词
كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء للغاية مع مطياف الكتلة; مصل; مستقلبات داخلية; تثبيط الوظيفة المناعية