تحديد خمسة مستقلبات داخلية في مصل الفئران المعرضة لنقص المناعة الناجم عن الحلقة الفوسفينامية باستخدام الكروماتوغرافيا السائلة فائقة الكفاءة المزدوجة المقترنة بمطياف الكتلة
تم استخدام تقنية الكروماتوغرافيا السائلة فائقة الكفاءة المزدوجة المقترنة بمطياف الكتلة (UPLC-MS/MS) لتطوير طريقة تحديد خمسة مستقلبات داخلية في مصل الفئران التي تعاني من نقص المناعة الناجم عن الحلقة الفوسفينامية، وهي الجلوتاثيون (GSH)، DL-جلوتامين ( DL-Gln)، حمض الجلوتاميك (GA)، 1-O-هيكساديسيل-SN-جلسرين-3-فوسفوكلولين (LPC (0-16∶0))، وحمض الأراكيدونيك (AA). بعد ترسيب البروتين في عينات المصل، تم استخدام عمود الكروماتوغرافيا ACQUITY Poroshell 120 SB-C18 (2.1 مم × 100 مم، 2.7 ميكرومتر)، مع طور متحرك من الميثانول ومحلول أسيتات الأمونيوم 5 ملليمول/لتر، لإجراء فاصل تدريجي لتحديد GSH، DL-Gln، GA، و AA؛ كما استخدم عمود ACQUITY UPLC BEH Amide (2.1 مم × 150 مم، 1.7 ميكرومتر)، مع طور متحرك من الأسيتونيتريل ومحلول فورمات الأمونيوم 5 ملليمول/لتر لأجل فاصل تدريجي لتحديد LPC(0-16∶0). استعمل القياس الكتلي بمصدر تأيين الرش الكهربائي (ESI) بوضع الأيونات الموجبة والسالبة، مع استخدام طريقة المؤشر الداخلي للكمية. أظهرت النتائج علاقة خطية جيدة بين تركيزات المواد الخمسة ضمن النطاق المحدد ( r >0.995)، وحدود الكشف كانت بين 0.043 و 0.178 نانوغرام/مل، وحدود التحديد بين 0.145 و 0.592 نانوغرام/مل. تتميز هذه الطريقة بالبساطة والسرعة والحساسية العالية، مما يجعلها مناسبة لتحديد المستقلبات الداخلية في مصل الفئران، وتوفر قاعدة تجريبية لدراسة آلية عمل الأدوية لعلاج نقص المناعة.