تهدف هذه الدراسة إلى إنشاء طريقة كشف جزيئية أحادية غير معنونة باستخدام مسام نانوية للتعرف على التوبولوجيا للبنية الرباعية الجوانين (G4). أولاً، باستخدام تسلسل G4 لمحفز عامل نمو بطانة الأوعية الدموية الموازي (VEGF) كموضوع اختبار، تم مقارنة أداء الكشف لجزيئات G4 باستخدام ثلاثة مسام نانوية: بروتين المسام من المتفطرة التدرنية (MspA)، الأيروسين (AeL)، والهموليزين α (HL)، واختيارهم للهموليزين α كقناة للمسح اللاحق. بعد ذلك، تم اختيار ثلاثة نماذج تمثيلية لـ G4 وهي تسلسل 27 زوج قاعدة لجين c-Myc الموازي (c-Myc27bp)، محول الثرومبين المعاكس (TBA)، وتسلسل G4 لحمض التيلومير البشري (H24A)، وتم التحقق من التكوين التوبولوجي باستخدام الطيف الدوراني الضوء (CD)، واستخدام مسام الهموليزين α لإجراء كشف تمييزي على مستوى الجزيء الفردي. لمشكلة الوقت الطويل للاحتجاز لمجموعة c-Myc27bp وانخفاض كفاءة المرور، تم إدخال 25 أدينين على كل طرف معاً لتكوين c-Myc77bp لتحسين سلوك المرور. أظهرت النتائج أن مسام الهموليزين α يمكنها التمييز بفعالية بين الحمض النووي أحادي السلسلة (ssAf17) وثلاثة أنواع توبولوجية مختلفة من جزيئات G4؛ حيث أن c-Myc77bp المحسن أنتج إشارات ثانوية مميزة خلال مرورها مما زاد من وضوح الإشارة وكفاءة المرور. تشير هذه النتائج إلى أن منصة الكشف الجزيئي الأحادي بمسام الهموليزين α يمكن استخدامها للتعرف غير المعنون على توبولوجيا G4، مما يوفر استراتيجية تقنية جديدة لتحليل البنية النووية المتقدمة، ويدعم أبحاث الآليات المرضية ذات الصلة بـ G4 وتطوير الأدوية المستهدفة.

تقنية المسام النانوية; الرباعية الجوانين; الكشف الجزيئي الأحادي; تمييز التوبولوجيا; الهموليزين α