تم إنشاء طريقة تحليل عالية الأداء كروماتوغرافيا سائلة-مطيافية الكتلة المزدوجة لتحديد بقايا سبيراميسين I ومستقلباته (نيو سبيراميسين I) في عضلات الحيوانات الأليفة والأعضاء والحليب. تم استخلاص العينات باستخدام محلول ثلاثي هيدروكسيميثيل أمينوميثان (Tris)، وترسيب البروتين بمحلول الفوسفات المائل، وتنقية باستخدام عمود HLB، وفصل باستخدام عمود كروماتوغرافيا C18 (100 مم×2.1 مم، 2.7 ميكرون)، مع غسيل متدرج للمراحل المتحركة باستخدام أسيترول والحمض الفورمي (0.1%). تم الكشف باستخدام مصدر تأين الرش الإلكتروي بالأيونات الموجبة ونمط مراقبة التفاعل المتعدد (MRM) مع تحديد كمي باستخدام طريقة المعيار الخارجي. تم دراسة تأثيرات مذيب الاستخلاص، وعمود الاستخلاص الطوري الصلب، ودرجة الحموضة على استرجاع المعزز، وتم تحسين ظروف الكروماتوغرافيا والمعلمات الطيفية الكتلية. أظهرت النتائج علاقة خطية جيدة لسبيراميسين I ومستقلباته في نطاق 0.2~20.0 ميكروغرام/لتر، بمعامل ارتباط (r) أكبر من 0.999، وحد الكشف للطريقة 10 ميكروغرام/كجم، وحد الكمّ الأدنى 50 ميكروغرام/كجم. عند تركيز إضافي 50~600 ميكروغرام/كجم، بلغ متوسط الاسترجاع 71.8%~102% والانحراف المعياري النسبي 1.7%~8.5%. تلبي هذه الطريقة متطلبات التحليل الفيزيائي والكيميائي للغذاء، ومناسبة لتحديد بقايا سبيراميسين I ومستقلباته في عضلات وأعضاء الحيوانات الأليفة والحليب في نفس الوقت.