تحديد كمية 37 حمضًا أمينيًا في المصل باستخدام كروماتوغرافيا السائل-مطيافية الكتلة الترادفية

ZHAO Yun-xia ,  

LI Zi-ying ,  

CHEN Xin ,  

ZHANG Yu-xin ,  

XIAO Wei-min ,  

LIU Ai-ping ,  

LI Mei-fang ,  

JIN Yi-bao ,  

DU Qing-ping ,  

WANG Qi ,  

SU Jia-ting ,  

YANG Guo-wu ,  

FANG Wen ,  

摘要

تم تطوير طريقة كمية لتحليل 37 نوعًا من الأحماض الأمينية في المصل باستخدام كروماتوغرافيا السائل-مطيافية الكتلة الترادفية (LC-MS/MS). بعد ترسيب البروتين باستخدام محلول 10٪ حمض السلفوساليسيليك المائي، تم فصل العينات باستخدام عمود كروماتوغرافي Phenomenex Kinetex F5 (250 مم × 4.6 مم، 5 ميكرومتر)، مع استخدام محلول مائي يحتوي على 0.02٪ حمض الفورميك-أسيتونيتريل كطور متدرج، وتم الكشف في وضع الأيونات الموجبة بواسطة مصدر التأين بالرش الكهربائي (ESI) ووضع المراقبة المتعددة للتفاعلات (MRM). تمت مصادقة الطريقة من حيث المنهجية، وأظهرت النتائج خطية جيدة للأحماض الأمينية الـ37 ضمن مدى من حد الكشف إلى 1000 نانوغرام/مل، مع معاملات ارتباط أكبر من 0.999، ووقت احتجاز من 4.60 إلى 9.16 دقيقة، وحد الكشف من 0.2 إلى 10.0 نانوغرام/مل، وحد الكمية من 0.5 إلى 20.0 نانوغرام/مل. متوسط نسبة الاسترداد عند تراكيز مختلفة بلغت 83.2% إلى 118%، والانحراف المعياري النسبي بين 0.90% و 9.4%. تم تطبيق الطريقة لتحليل 49 عينة مصل، حيث لم يتم الكشف عن الكارنوزين والسيستيوسين، وكان معدل الكشف عن الهوموسيستين 10.20%، بينما تجاوز معدل الكشف لـ 34 حمضًا أمينيًا آخر 90%. تتميز الطريقة بدقة عالية وحساسية وخصوصية، ويمكن استخدامها لقياس محتوى الأحماض الأمينية في عينات المصل، مما يوفر بيانات تفصيلية للأمراض المرتبطة باضطرابات استقلاب الأحماض الأمينية.

关键词

كروماتوغرافيا السائل-مطيافية الكتلة الترادفية;الأحماض الأمينية;المصل;حمض السلفوساليسيليك

阅读全文