في التضخيم التقليدي لمؤشر التضاعف، تكون طاقة نهاية حمض النووي الهدف ونهاية قالب التضخيم متناظرة، ومع ذلك، عند تمازج حمض النووي الهدف مع نهاية 5’ للقالب، يصبح بدء التضخيم صعبًا، مما يحد من تحليل الحمض النووي الهدف بالكميات النزرة. تطور هذه الورقة استراتيجية تضخيم مؤشر ثابت بدرجة حرارة ثابتة مستوحاة من التمازج غير المتماثل (AEXPRA) لتحليل سريع وحساس للغاية لـ microRNA. مع miR-196b كهدف، وباستناد إلى قالب تضخيم غير متماثل مصمم، نظرًا لأن الهدف مكمل تمامًا لنهاية 3’ للقالب ولكنه مكمل جزئي لنهاية 5’، يمكن لـ miR-196b التمازج بالكامل مع نهاية 3’ للقالب. تتميز الطريقة بحساسية عالية، وتحديد قوي، وسرعة فائقة. إجمالي زمن التفاعل أقل من 30 دقيقة، ويمكن الكشف عن miR-196b حتى تركيز 0.42 amol/L. للتحقق من التطبيق العملي للطريقة، تم استخدامها لتحليل miR-196b في مستخلصات المصل، حيث تفصل بنجاح بين تعبير miR-196b في مرضى سرطان الرئة غير صغير الخلايا والأشخاص الطبيعيين، وكانت النتائج متوافقة مع PCR الكمي الفوري (RT-qPCR). تمتاز الطريقة بدقة وموثوقية عاليتين، مما يجعلها واعدة في تشخيص miRNA السريري والدراسات المرضية.

تضخيم مؤشر ثابت;microRNA;الكشف بالتألق;تشخيص الأمراض