Edwardsiella tarda البطيء (Edwardsiella tarda) هو بكتيريا ممرضة هامة في تربية الأحياء المائية، ويمكن لمنهجيات الكشف السريعة والفعالة والمناسبة للموقع أن تمنع وتتحكم بشكل فعال في حدوث الأمراض. يجمع هذا البحث بين تضخيم الحلقة الدائرية (RCA) وتقنية شرائط الكروماتوجرافيا (LFS)، ويستخدم كريات اللاتكس كعلامة، حيث تم تطوير طريقة جديدة للكشف عن Edwardsiella tarda باستخدام RCA-LFS. تم تصميم مسبار القفل والبادئات المضاعفة استنادًا إلى جين gyrb الخاص بهذه البكتيريا، وتم تحديد شروط RCA المحسنة كما يلي: تركيز مسبار القفل 500 pmol/L، ودرجة حرارة التضخيم 61 ℃، ووقت التضخيم 50 دقيقة. بعد التضخيم، تُغمس شرائط الكروماتوجرافيا مباشرة في محلول منتج التضخيم، ويتم قراءة النتائج بالعين المجردة. تتميز هذه الطريقة بخصوصية عالية، ولا تتفاعل مع مسببات الأمراض الشائعة الأخرى، ويصل حد الكشف لجينوم DNA لـ Edwardsiella tarda إلى 50 نانوغرام/مل. مقارنة بعلامات الذهب الغروية الشائعة، فإن كريات اللاتكس أكثر استقرارًا ولها ألوان متعددة، ومن المتوقع أن تسمح بالكشف المتزامن لأنواع متعددة من البكتيريا من خلال التغير اللوني فقط. تم اختبار طريقة RCA-LFS على عينات من ثعبان البحر الياباني المصاب، وكانت النتائج متوافقة مع نتائج الرحلان الكهربائي التقليدي، ولكن الطريقة أبسط وأسرع وأسهل في الحكم على النتائج. تلعب RCA-LFS دورًا بارزًا في الكشف الميداني عن البكتيريا الممرضة.

تضخيم الحلقة الدائرية;Edwardsiella tarda البطيء;مسبار القفل;كريات اللاتكس;شرائط الكروماتوجرافيا