用邻苯二甲醛(OPA)-9-芴基甲氧基羰酰氯(FMOC)柱前衍生反相高效液相色谱法测定了婴幼儿血浆中的游离氨基酸。衍生由自动进样器在线自动完成;氨基酸的衍生物用Hypersil ODS反相柱分离

荧光检测器检测;流动相A为10 mmol.L-1pH 7.2的磷酸盐溶液(PB)

含0.5%(φ)四氢呋喃;流动相B为PB-甲醇-乙腈(体积比50∶35∶15);用二元线性梯度程序洗脱

0 min时A为100%

B为0%;25 min时A为0%

B为100%。本法在25 min内使22种氨基酸全部得到良好分离

分离度大于1.5

最小检出限为1 nmol.mL-1

在20

3

00 nmol.mL-1浓度范围内

22种氨基酸的峰面积和浓度之间的线性相关系数在0.982

0

.999之间

保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.05%

0

.50%和0.7%

2

.9%

回收率为98%

1

01%。用本法在医院送检的血浆样品中检出了高甘氨酸血症、苯丙酮尿症、精氨琥珀酸血症、胍氨酸血症、同型半胱氨酸尿症、枫糖尿症和酪氨酸血症等氨基酸遗传代谢缺陷症。